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          東亞牌液氮罐產(chǎn)品系列

          凍存樣品長(zhǎng)時(shí)間存放后如何確保樣品質(zhì)量不受影響

          發(fā)布日期:2024-12-31  閱讀量:170

            凍存樣品在長(zhǎng)時(shí)間存放后,保持樣品質(zhì)量不受影響的關(guān)鍵是確保其在整個(gè)保存周期內(nèi)保持穩(wěn)定的低溫環(huán)境,并采取適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)措施以減少可能的損害。對(duì)于大多數(shù)生物樣品來(lái)說(shuō),溫度波動(dòng)、凍融過(guò)程及凍存液的選擇等因素,都會(huì)直接影響樣品的完整性與可用性。為了確保凍存樣品的質(zhì)量,必須采取一系列科學(xué)且嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆椒ǎ瑥膬?chǔ)存設(shè)備的選擇到凍存過(guò)程中的每個(gè)環(huán)節(jié),都需要精心把控。

            控制儲(chǔ)存溫度的穩(wěn)定性

            凍存樣品的溫度控制是基礎(chǔ)也是關(guān)鍵的因素。樣品通常存儲(chǔ)在-80°C的超低溫冰箱或液氮罐中,這些環(huán)境能夠有效抑制細(xì)胞活動(dòng)并減緩生物化學(xué)反應(yīng)。然而,在長(zhǎng)期保存中,溫度波動(dòng)常常是樣品質(zhì)量劣化的主要原因之一。為了確保溫度的穩(wěn)定性,推薦使用溫控的設(shè)備,如帶有溫度記錄功能的超低溫冰箱或液氮罐。這些設(shè)備能夠在不同的時(shí)間點(diǎn)記錄溫度數(shù)據(jù),并且在溫度出現(xiàn)異常時(shí)觸發(fā)報(bào)警系統(tǒng)。

            - 超低溫冰箱的溫控精度應(yīng)達(dá)到±0.5°C,液氮罐的溫度波動(dòng)控制在±1°C以內(nèi)。

            - 對(duì)于長(zhǎng)期保存的樣品,液氮罐內(nèi)的液氮需要每月補(bǔ)充,確保樣品始終浸泡在液氮中。液氮罐的低溫度通常為-196°C,保證樣品不會(huì)解凍。

            在實(shí)際操作中,還應(yīng)注意避免頻繁開(kāi)關(guān)凍存設(shè)備,因?yàn)槊看伍_(kāi)關(guān)都會(huì)導(dǎo)致溫度的波動(dòng),對(duì)樣品造成潛在損害。好在必要時(shí)進(jìn)行短時(shí)間開(kāi)關(guān),并確保操作快速且高效。

            使用合適的凍存介質(zhì)

            凍存介質(zhì)是保護(hù)凍存樣品免受低溫?fù)p傷的另一關(guān)鍵因素。許多生物樣品,尤其是細(xì)胞和組織,在凍結(jié)過(guò)程中會(huì)形成冰晶,這些冰晶可能刺破細(xì)胞膜,導(dǎo)致細(xì)胞死亡或功能喪失。因此,使用含有抗凍劑的凍存介質(zhì),可以有效減少冰晶的形成。

            常用的凍存介質(zhì)包括含有二甲基亞砜(DMSO)和甘油的溶液。這些抗凍劑能有效保護(hù)細(xì)胞在凍結(jié)和解凍過(guò)程中的完整性。凍存液的常見(jiàn)配方為:

            - 10% DMSO + 90%培養(yǎng)基或PBS

            - 20%甘油 + 80%培養(yǎng)基

            在使用凍存介質(zhì)時(shí),要確保樣品充分混勻,避免凍存液不均勻?qū)е虏糠謽悠穬龃娌煌耆?。?duì)于血液樣品,常用的凍存液還包括含有10%到20%葡萄糖溶液的配方,以維持細(xì)胞的代謝穩(wěn)定。

            避免凍融損傷

            凍融過(guò)程是凍存樣品中容易導(dǎo)致質(zhì)量下降的環(huán)節(jié)。樣品在解凍時(shí),溫度突然變化容易造成細(xì)胞內(nèi)外液體的不均勻膨脹,進(jìn)而對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成損傷。為避免凍融帶來(lái)的損害,凍存樣品解凍時(shí)應(yīng)采用溫度逐漸升高的方式。

            - 解凍溫度:對(duì)于-80°C凍存樣品,解凍時(shí)可使用37°C水浴,并且每次解凍時(shí)間控制在2-3分鐘以內(nèi)。避免過(guò)長(zhǎng)時(shí)間暴露在水浴中,以免導(dǎo)致細(xì)胞受損。

            - 對(duì)于液氮凍存的樣品,解凍時(shí)可直接取出放置于37°C水浴中,快速解凍后進(jìn)行后續(xù)操作。

            凍融過(guò)程中,快速操作非常關(guān)鍵,盡量減少樣品暴露于環(huán)境中的時(shí)間。解凍后的樣品應(yīng)該盡快轉(zhuǎn)移到適宜的培養(yǎng)或儲(chǔ)存條件下,避免長(zhǎng)時(shí)間放置在室溫下。

            樣品的定期檢查與質(zhì)量監(jiān)控

            長(zhǎng)時(shí)間存放凍存樣品時(shí),定期檢查是確保樣品質(zhì)量不受影響的重要環(huán)節(jié)。即使在恒定溫度條件下存儲(chǔ),凍存樣品的質(zhì)量也可能隨著時(shí)間的推移而出現(xiàn)微妙變化。為此,建議每隔6個(gè)月或12個(gè)月進(jìn)行一次質(zhì)量檢測(cè),尤其對(duì)于重要的細(xì)胞或組織樣品。

            檢測(cè)內(nèi)容包括:

            - 細(xì)胞活性測(cè)試:通過(guò)細(xì)胞計(jì)數(shù)、染色法(如臺(tái)盼藍(lán)排除試驗(yàn))來(lái)評(píng)估細(xì)胞存活率。

            - 生物活性測(cè)試:比如使用PCR技術(shù)檢測(cè)凍存樣品中DNA的完整性,或使用Western Blot檢測(cè)蛋白質(zhì)的表達(dá)水平。

            - 代謝功能:評(píng)估樣品解凍后的代謝功能,如能量代謝是否正常。

            檢測(cè)結(jié)果應(yīng)記錄并與歷史數(shù)據(jù)對(duì)比,發(fā)現(xiàn)任何異常及時(shí)采取措施調(diào)整凍存方式或存儲(chǔ)條件。

            保持良好的樣品管理系統(tǒng)

            一個(gè)完善的樣品管理系統(tǒng)可以幫助確保凍存樣品在長(zhǎng)時(shí)間存放中的質(zhì)量。應(yīng)建立樣品標(biāo)簽、存儲(chǔ)位置記錄和批次跟蹤等管理制度。每個(gè)凍存樣品都應(yīng)有的標(biāo)識(shí)符和存儲(chǔ)位置記錄,避免樣品因長(zhǎng)期存放而丟失或混淆。

            - 樣品存儲(chǔ)位置應(yīng)清晰標(biāo)明,每個(gè)樣品可配備二維碼標(biāo)簽,方便掃描和跟蹤。

            - 定期檢查凍存設(shè)備運(yùn)行狀態(tài),并進(jìn)行必要的維護(hù),如清潔、除霜、檢查制冷系統(tǒng)等,確保設(shè)備長(zhǎng)期高效運(yùn)行。

            一個(gè)合理的樣品管理系統(tǒng)能夠有效提高凍存樣品的可追溯性,避免在保存過(guò)程中的任何疏漏,從而保障樣品的質(zhì)量。

            通過(guò)的溫度控制、適當(dāng)?shù)膬龃娼橘|(zhì)、科學(xué)的凍融操作、定期的樣品質(zhì)量檢測(cè)以及良好的管理系統(tǒng),可以顯著提高凍存樣品在長(zhǎng)時(shí)間存放后的質(zhì)量穩(wěn)定性。每一個(gè)環(huán)節(jié)都需要細(xì)致操作,確保樣品能夠在長(zhǎng)期保存中保持其功能性和可用性。


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